技術(shù)共探 | 皮膚致敏試驗(yàn)解讀！

過敏性接觸性皮炎是皮膚局部接觸外源化學(xué)品引起的免疫性皮膚反應(yīng)，相應(yīng)的皮膚致敏篩查是化學(xué)品分類標(biāo)識(shí)、化妝品和皮膚接觸產(chǎn)品毒性評價(jià)的重要內(nèi)容。檢測致敏物質(zhì)的傳統(tǒng)試驗(yàn)包括豚鼠局部封閉涂皮試驗(yàn)（Buehler test）和豚鼠最大值試驗(yàn)（GPMT test）。為保護(hù)動(dòng)物福利且數(shù)量龐大的化學(xué)物質(zhì)、健康相關(guān)產(chǎn)品、植物原料等的安全評價(jià)也需要高通量的方法進(jìn)行篩檢，皮膚致敏體外方法開發(fā)成為當(dāng)前替代方法研究的熱點(diǎn)。經(jīng)濟(jì)合作與發(fā)展組織OECD在 2012年發(fā)布了關(guān)于蛋白質(zhì)共價(jià)結(jié)合引起的皮膚致敏有害結(jié)局通路（Adverse Outcome Pathway, AOP）及基于 AOP原理研發(fā)的替代試驗(yàn)相關(guān)文件。

化妝品常見過敏原有哪些？

美國食品藥品監(jiān)督管理局（FDA）整理了一些化妝品中常見過敏原清單，主要分為以下五類：

1、天然橡膠

天然橡膠，在標(biāo)簽中有時(shí)也標(biāo)注為乳膠（latex）, 乳膠中多含水溶性蛋白，部分人群容易乳膠過敏。

2、香精

香精，這是最常見的過敏原，是導(dǎo)致化妝品過敏性接觸性皮炎的最主要原因。香料可以是天然或化學(xué)合成的。在歐盟，有26種香精過敏源，當(dāng)它們在駐留產(chǎn)品中（例如面霜和香水）的濃度超過0.001%，在沖洗類產(chǎn)品中（洗發(fā)水和沐浴露）的濃度超過0.01%時(shí)，必須在產(chǎn)品標(biāo)簽上注明。

3、防腐劑

防腐劑會(huì)殺死污染化妝品的微生物，延長產(chǎn)品的保存時(shí)間，它們還會(huì)與皮膚發(fā)生反應(yīng)，造成接觸性皮炎。防腐劑的類型及其引起的皮炎會(huì)隨著時(shí)間的推移發(fā)生變化。

4、染料、色彩添加劑

染料和色彩添加劑，如p-苯二胺（p-Phenylenediamine）煤焦油（Coal-tar）

5、金屬

金屬，如鎳（Nickel）、金（Gold）

體外皮膚致敏結(jié)果判定

OECD TG 442C/442D/442E通常需要按照“2 out of 3"確定方法開展，能夠辨別化學(xué)物質(zhì)為致敏物與非致敏物。單獨(dú)的一個(gè)關(guān)鍵事件不足以得出化學(xué)物質(zhì)是否存在皮膚致敏潛力的結(jié)論。

如果來自兩個(gè)關(guān)鍵事件的試驗(yàn)方法結(jié)果均為陽性，則最終結(jié)果為皮膚致敏劑，不需要進(jìn)行進(jìn)一步的檢測。如果來自兩個(gè)關(guān)鍵事件的試驗(yàn)方法結(jié)果均為陰性，則最終結(jié)果為陰性（非皮膚致敏性），不需要進(jìn)一步檢測。如果結(jié)果不一致，則需要進(jìn)行其他關(guān)鍵事件的試驗(yàn)方法。

微譜皮膚致敏體外實(shí)驗(yàn)測試方案